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强直性脊柱炎实验室检查HLA-B27的方法和意义是什么?

2018-10-11 10:06| 发布者: jisow| 查看: 211| 评论: 0

简介:现已发现B27基因有22个亚型(B*2701〜*2722),多数与AS相关。由此推断,各种B27亚型分子肽结合槽中存在共同结构,其对致病抗原肽的提呈以及AS的发生至关重要。研究证实,被B27分子这一共同结构选择性结合的 ...

    现已发现B27基因有22个亚型(B*2701*2722),多数与AS相关。由此推断,各种B27亚型分子肽结合槽中存在共同结构,其对致病抗原肽的提呈以及AS的发生至关重要。研究证实,被B27分子这一共同结构选择性结合的,是一个第2锚着残基为精氨酸的9肽,B27分子可选择性地将该抗原肽提呈给CD8+CTLB27基因亚型具有不同的种族和人种流行情况,研究证明是由B*2705基因发生点突变、基因异位和其他的机制形成,各基因亚型之间的差别仅是一个或数个氨基酸的不同。其中B*2705分布最广,见于所有人种,而B*2701B*2708.B*2710B*2711B*2712频率很低。


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(一)检测方法

    HLA-B27属于I类抗原,HLA-I类抗原广泛分布于白细胞等所有有核细胞的表面及血小板上,通常采用HLA血清学分型法中的微量补体俄赖淋巴细胞毒试验进行检测。  

    其原理是:具有细胞毒作用的抗体(含于标准分型血清中)与待测细胞表面HLA特异抗原相结合,抗体分子上的补体结合点暴露,与补体相结合,在淋巴细胞表面发生一连串的补体级联反应,生产具有攻击细胞膜活性的补体活化片段,对细胞产生损伤或裂解的细胞毒作用。然后利用染料排斥实验来判别待检细胞的死活,根据死细胞的百分率判断细胞毒强弱,在实验系统中,若出现细胞毒现象,实验结果为阳性,反之则为明性。

    另外还有流式细胞术法、酶联反应测定法、PCR-SSP法等。其中PCR-SSP法是近年来发展十分迅速的一种体外扩增基因的新技术,这种方法特异性强、快捷、简便、准确且不需要活的细胞标本,只需极少量的细胞在3~4小时内即可把目的基因扩增数百万倍,从基因的水平进行B27检测。


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(二)临床意义

 1. 在与HLA-B27相关的血清阴性脊柱关节病中,AS与HLA-B27的相关性最强。大约80%-90%AS患者HLA-B27性。有研究发现HLA-B27阳性者患AS的几率是HLA-B27明性者的200~300倍。且已证实HLA-B27分子是AS的原发关联成分,其直接的实验依据为:导入人B27基因的转基因大鼠可发生类似强直性脊柱炎的疾病。

 2. HLA-B27与AS的相关强度具有明显的民族和种族差异。我国AS患者中HLA-B27阳性率为80%-100%Haida印第安人50%HLA-B27阳性,而只有12%HLA-B27阳性个体患AS。在4%13%携带HLA-B27抗原的白种人中仅有1.0%~6.7%的个体患病。

 3. HLA-B27在正常人中的阳性率约为4%〜6%,其他可见于银屑病性关节炎、Reiter综合征、肠病性关节炎、幼年类风湿关节炎及沙门菌感染后关节炎等。类风湿关节炎HLA-B27阳性率不髙。

所以HLA-B27阳性只对诊断AS有重要参考价值,而不能根据是否存在HLA-B27而确定或排除AS的诊断。对于尚不符合谈断标准的高度疑似的病例/检查HLA-B27有利于对疾病的早期途断及预防。


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